Test de la catalase sur les bactéries pour déterminer leur capacité à dégrader le peroxyde d'hydrogène (avec figure)

Test de la catalase sur les bactéries pour déterminer leur capacité à dégrader le peroxyde d'hydrogène (avec figure)!

Principe:

Certaines bactéries peuvent dégrader le peroxyde d'hydrogène (H ₂ 0 ₂ ) en eau (H ₂ O) et en oxygène (0, ↑), car elles peuvent produire l'enzyme «catalase».

La décomposition du peroxyde d'hydrogène par la catalase est indiquée par des bulles d'oxygène libre (0, ↑).

Dans le test à la catalase, une boucle de la bactérie à tester est placée dans une goutte de peroxyde d’hydrogène prélevée sur une lame. Si la bactérie est capable de produire de la catalase, elle transforme le peroxyde d'hydrogène (H ₂ O ₂ ) en eau et en oxygène. La production d'oxygène provoque des bulles ou de la formation de mousse, ce qui peut être remarqué dans la goutte.

Matériaux nécessaires:

Lames, papier absorbant, boucle d'inoculation, brûleur Bunsen, chambre à flux laminaire, peroxyde d'hydrogène (3%), colonies isolées ou cultures pures de bactéries.

Procédure:

1. Une lame est nettoyée sous l'eau du robinet (figure 7.18).

2. La lame est essuyée avec du papier absorbant et séchée à l'air.

3. Une goutte de peroxyde d'hydrogène (3%) est prélevée au centre de la lame.

4. Une boucle des bactéries à tester est prélevée de manière aseptique, de préférence dans une chambre à flux laminaire, à l'aide d'une boucle stérilisée à la flamme et placée dans la goutte de peroxyde d'hydrogène présente sur la lame. La boucle est stérilisée après chaque inoculation.

Observations:

1. Des bulles ou de la mousse se forment dans la goutte: Catalase positive.

2. Il n’ya pas de formation de bulles ni de mousse dans la goutte: négatif pour la catalase.

Précautions:

Une culture de bactéries à partir de gélose au sang ne peut pas être utilisée pour le test de la catalase, car le sang contient de la catalase et donne toujours un résultat positif. Les bactéries catalases négatives ont tendance à mourir dans un milieu sans sucre, soit parce qu'elles produisent de l'H ₂ 0 _2, soit parce que l'H ₂ 0 ₂ s'accumule dans le milieu, lorsqu'elles sont exposées à l'air et à la lumière.

Par conséquent, les cultures mères de ces bactéries doivent être conservées dans l’obscurité et là où l’accès à l’air est limité. La catalase est présente dans presque toutes les bactéries pouvant se développer en aérobiose. Comme l'enzyme n'est produite que par des bactéries viables, les cultures de plus de 24 heures ne peuvent pas être utilisées pour le test de la catalase.