2 Type de méthodes d'électrophorèse des protéines sériques (avec figure)

Le sérum contient un certain nombre de protéines. En 1937, Arne W Tiselius a introduit la méthode de séparation des différentes protéines dans un champ électrique.

En électrophorèse, les protéines sont séparées dans un champ électrique. Plus tard, une électrophorèse en zones sur papier ou acétate de cellulose a été développée. En 1952, une méthode en deux étapes a été développée associant électrophorèse et immunodiffusion. Par la suite, C Williams, P Graber et M Poulik ont ​​présenté la méthode classique d'immunoélectrophorèse (dans laquelle l'électrophorèse et la double immunodiffusion sont effectuées sur la même lame revêtue d'agar).

1. Electrophorèse de zone:

Les protéines peuvent être séparées sur la base de leurs charges électriques de surface. Un support inerte tel que le papier, l'acétate de cellulose ou la gélose est utilisé pour la séparation. L'échantillon de sérum est placé sur le support. Le support est ensuite connecté aux pôles positif et négatif de l'appareil d'électrophorèse. Sous le champ électrique, les protéines se chargent et se déplacent à travers le support. Leur mouvement dépend de leur charge électrique.

Puisque différentes molécules de protéines ont des charges différentes, elles se déplacent vers des positions différentes dans le support. L'électrophorèse est généralement effectuée pendant 60 à 120 minutes ou plus. Ensuite, les protéines sont colorées et examinées visuellement ou scannées dans un densitomètre. Le balayage par densitomètre des fractions de protéines séparées et colorées convertit chaque bande en motif en son pic caractéristique et facilite la quantification de chaque fraction de protéines.

2. Electrophorèse des protéines sériques:

Le sérum humain normal est séparé en cinq bandes électrophorétiques principales: albumine, α ₁ -globuline, α ₂ -globuline, β-globuline et y-globuline (Fig. 27.5).

L'électrophorèse en zones est utile dans le diagnostic de certaines maladies humaines:

Figures 27.5A à C:

Electrophorèse sur bande d'acétate de cellulose et balayage densitométrique d'une bande de papier d'acétate de cellulose: A et A1: Bandes de protéines sériques normales sur une bande d'acétate cellulaire visualisées après coloration (A) et balayage densitométrique à partir d'une bande d'acétate de cellulose (A1).

B et B1: hypergammaglobulinémie

C et C1: hypogammaglobulinémie

je. Myélome multiple et macro-globulinémie de Waldenström. Dans ces maladies, un pic protéique limité par électrophorèse se produit généralement dans la région γ-globuline. Le pic représente une accumulation d'une immunoglobuline monoclonale. Les immunoglobulines monoclonales ont une charge de surface définie, ce qui entraîne la formation d'une pointe (alors que le schéma normal d'immunoglobulines polyclonales produit un frottis dans la région de la y-globuline).

ii. Hypogammaglobulinémie (diminution marquée de la gamma globuline sérique).

iii. Hypoprotéinémie (réduction marquée de toutes les protéines sériques).

iv. Hypoalbuminémie:

Réduction de l'albumine, qui se produit dans de nombreuses maladies du foie et du rein.

v. L'électrophorèse de l'urine aide à la détection des chaînes légères d'immunoglobuline libres, telles que la protéine Bence-Jones.

vi. L'électrophorèse par zone du liquide céphalo-rachidien (LCR) aide au diagnostic de la sclérose en plaques et d'autres troubles du système nerveux central. L'électrophorèse des protéines sériques est considérée comme un test de dépistage permettant de détecter des anomalies protéiques. Une analyse plus approfondie est nécessaire pour trouver les anomalies spécifiques.