Expérience de mesure de la taille de microorganismes sous microscope (avec figure)

Expérimentez pour mesurer la taille des microorganismes au microscope!

Objectif:

La micrométrie (micro: microscopique, métrie: mesure) est la mesure des dimensions d'objets microscopiques en termes de longueur, de largeur, de diamètre et d'épaisseur. Les micro-organismes sont des objets microscopiques, car ils ne sont pas visibles à l'œil nu et ne peuvent être observés qu'au microscope.

Très souvent, il est nécessaire de mesurer leurs dimensions en termes de longueur, de largeur et de diamètre. En raison de leur taille minuscule, la mesure de leurs dimensions doit être effectuée au microscope. Ainsi, la micrométrie a pour but de mesurer les dimensions des microorganismes au microscope.

Principe:

La mesure des dimensions des micro-organismes est réalisée au microscope à l'aide de deux micro-échelles appelées «micromètres». Les deux micromètres ont des graduations microscopiques gravées à la surface. L'un d'eux, le «micromètre oculaire», est un disque de verre circulaire qui s'insère dans l'étagère circulaire située à l'intérieur de l'oculaire.

Des graduations arbitraires sont gravées sur sa surface. Cependant, la distance entre les graduations gravées est constante pour un micromètre oculaire particulier. L'autre micromètre, appelé «micromètre de stade», est une lame de verre spéciale qui est clipsée sur la platine du microscope. Il comporte des graduations standard gravées à la surface, distantes de 10 µm.

Étalonnage:

En utilisant l'objectif requis, les graduations sur le micromètre oculaire sont calibrées par rapport aux graduations standard sur le micromètre de platine. La calibration est nécessaire car la distance entre les graduations oculaires varie en fonction de l'objectif utilisé, ce qui détermine la taille du champ.

Pour l'étalonnage, les deux gravures au micromètre sont superposées en faisant pivoter l'oculaire. Le nombre de divisions oculaires (OD) coïncidant avec le nombre de divisions de stade (SD) est déterminé.

À partir de là, le facteur de calibration pour une division oculaire (DO) est calculé comme suit:

Si 10 OD coïncide avec 2 SD, alors

10 OD = 2 SD = 2 x 10 µ = 20 µ (… 1 SD = 10 µ)

1 OD = 20/10 µ = 2 µ

Ainsi, la distance entre deux gravures oculaires adjacentes est de 2 µ (le facteur de calibration est de 2 µ).

La mesure:

Après étalonnage, le micromètre de la platine est retiré et le microbe, dont les dimensions doivent être mesurées, est placé sur la platine sur une diapositive et focalisé. Maintenant, le nombre de divisions oculaires occupées par le microorganisme est compté. Ensuite, en multipliant ce nombre de divisions par le facteur d'étalonnage, la taille du microbe est déterminée comme suit.

Si le microbe occupe 6 OD de longueur, sa longueur = 6 x facteur d'étalonnage = 6 x 2 = 12 µ.

Il est possible de mesurer la taille des microbes en les observant directement sur un micromètre de platine. Cela éviterait l'étalonnage et les calculs. Mais le micromètre de platine est une échelle standard, ce qui est coûteux à cause des microgravures qu’il contient. Si elle est utilisée fréquemment pour l'observation directe, ses gravures sont usées.

De plus, les gravures sur le micromètre de la platine sont plus espacées (environ 10 fois) que celles sur le micromètre oculaire. Ainsi, les dimensions ne peuvent pas être déterminées avec précision au micromètre de platine. C'est pourquoi; il n'est jamais utilisé pour la mesure directe.

Matériaux nécessaires:

Micromètre oculaire, micromètre de stade, lame, microscope, microbe.

Procédure:

1. L'oculaire est retiré du microscope et son couvercle supérieur est dévissé. Le couvercle est enlevé. Avec précaution, le cristallin (Figure 5.15) est retiré. Le micromètre oculaire (une pièce de verre gravée circulaire qui se glisse dans l’oculaire) est placé avec précaution dans l’oculaire. La lentille oculaire est placée à l'arrière et le couvercle supérieur est vissé dans son état d'origine. L'oculaire est replacé dans le microscope.

2. Le micromètre de la platine est clipsé sur la platine et les gravures sont centrées en déplaçant la platine mécanique.

3. L'objectif de faible puissance est pris pour positionner.

4. L'oculaire est tourné jusqu'à ce que les gravures se superposent sur les deux micromètres.

5. L'objectif requis est pris pour se positionner. L’objectif recherché est celui qui permet de visualiser l’ensemble du micro-organisme et de couvrir le champ microscopique dans toute la mesure du possible.

6. Lorsque l'objectif requis est en place (pour l'objectif à immersion dans l'huile, une goutte d'huile est déposée sur le micromètre de la platine), la platine mécanique est déplacée de sorte qu'une ligne du micromètre de la platine coïncide avec une ligne du micromètre oculaire. Ensuite, une autre ligne est recherchée sur le micromètre oculaire, qui coïncide avec une autre ligne sur le micromètre de la platine. Le nombre de divisions entre les lignes coïncidentes est compté pour les deux micromètres.

7. Le facteur d'étalonnage de l'objectif utilisé est calculé.

8. De manière similaire, les facteurs d'étalonnage sont calculés pour les autres objectifs.

9. Le micromètre d'étape est retiré.

10. La lame contenant le microbe à observer est placée sur la platine et focalisée.

11. Le nombre de divisions oculaires couvertes par le microbe est compté en regardant à travers l'oculaire.

12. La taille du microorganisme est déterminée en multipliant le nombre de divisions oculaires couvertes par le microbe par le facteur d'étalonnage.