Méthode chimique d'évaluation du médicament

La détermination des constituants actifs dans un médicament par un procédé chimique est appelée évaluation chimique.

a) Essai d'alcaloïdes:

je. Test de Mayer:

Testez l'échantillon et ajoutez le réactif de Mayer (solution d'iodure de potassium et de mercure) pour obtenir un précipité crémeux, présence d'alcaloïdes.

ii. Test de Wagner:

Testez l'échantillon et ajoutez le réactif de Wagner (solution aqueuse d'iode) pour obtenir un précipité brun rougeâtre.

iii. Test Dragendorffs:

Tester l'échantillon et ajouter le réactif de Dragendorffs (solution d'iodure de potassium et de bismuth) pour obtenir un précipité brun rougeâtre.

iv. Test de Hagar:

Testez l'échantillon et ajoutez les réactifs de Hager (solution d'acide picrique saturée) pour obtenir un précipité jaune.

b) Test de glycosides:

i) Tests de glycosides de saponine:

une. Test de la mousse:

Agitez vigoureusement l'extrait médicamenteux ou la poudre sèche avec de l'eau. Mousse persistante observée.

b. Test hémolytique:

Ajoutez l’extrait de drogue ou la poudre sèche à une goutte de sang déposée sur une lame de verre. La zone hémolytique apparaît.

ii) Recherche d'anthraquinone glycoside:

une. Test de Borntranger:

Les médicaments sont bouillis avec de l'acide sulfurique dilué, filtrés et refroidis. Le filtrat est extrait avec du chloroforme ou du benzène et de l'ammoniac dilué y est ajouté. La couche d'ammoniaque devient rose à rouge en raison de la présence de dérivés d'anthraquinones.

iii) Analyses chimiques des glycosides cardiaques:

une. Test de Raymond:

Au médicament, ajoutez quelques ml d'éthanol à 50% et 0, 1 ml d'une solution à 1% de m-dinitrobenzène dans de l'éthanol. Ajoutez à cette solution 2-3 gouttes de solution d'hydroxyde de sodium à 20%. Les couleurs violettes apparaissent, ceci est dû à la présence du groupe méthylène actif.

b. Test juridique:

Au médicament, ajoutez quelques ml de pyridine et 2 gouttes de nitroprussiate et une goutte de solution d'hydroxyde de sodium à 20%. Une couleur rouge foncé est produite.

c. Killer killiani test:

Le glycoside est dissous dans un mélange de solution de sulfate ferrique à 1% dans de l’acide acétique glacial (5%). Ajouter une ou deux gouttes d'acide sulfurique concentré. Une couleur bleue se développe en raison de la présence de sucre désoxy.

ré. Test au xanthydrol:

Le brut est chauffé avec une solution à 0, 1 à 5% de xanthydrol dans de l'acide acétique glacial contenant 1% d'acide chlorhydrique. Une couleur rouge est produite en raison de la présence de 2-désoxysucre.

e. Test baljet:

Prenez un morceau de lamina ou une section épaisse de la feuille et ajoutez le réactif picrate de sodium. Si le glycoside est présent, on verra une couleur jaune à orange.

F. Test de Kedde:

Une solution de glycosides est traitée avec une petite quantité de réactif de Kedde (mélanger des volumes égaux d'une solution à 2% d'acide 3-5 dinitrobenzoïque dans du menthol et d'une solution aqueuse à 7, 5% de KOH). Le développement d'une couleur bleue ou violette qui s'est estompée en 1 à 2 heures montre la présence de cardinoloïdes.

c) Tests de tanins:

je. Test de gélatine:

A une solution de tanin, une solution aqueuse de gélatine et de chlorure de sodium est ajoutée. Il se forme un précipité de couleur chamois blanche.

ii. Test cutané du batteur d'or:

Un petit morceau de peau de batteur d'or (membrane préparée à partir de l'intestin d'un bœuf) est trempé dans de l'acide chlorhydrique à 20%, entouré d'eau distillée et placé dans une solution de tanin pendant 5 minutes. Le morceau de peau est lavé avec de l'eau distillée et maintenu dans une solution de sulfate ferreux. Une couleur brune ou noire se forme sur la peau en raison de la présence de tanins.

d) Recherche d'hydrate de carbone:

je. Test de molish:

A 5 ml d'échantillon de solution dans un tube à essai, ajoutez 2 gouttes de réactif de molish (solution à 5% d'a-naphtol dans de l'alcool). Bien mélanger. Inclinez le tube et laissez couler environ 3 ml de H2S04 concentré dans le tube latéral, formant ainsi une couche d'acide sous le sucre. Une zone violet rougeâtre apparaît à la jonction entre les deux liquides.

ii. Test de Fehling:

Prenez la solution de Fehling (A + B) dans une éprouvette, ajoutez la solution d'échantillon et faites bouillir. Formation d'un précipité d'oxyde cuivreux brun rougeâtre, présence de sucre réducteur

iii. Test de Benoît:

Prélevez la solution d'échantillon et ajoutez le réactif Benedict, mélangez bien, faites bouillir le mélange vigoureusement pendant deux minutes. Pour produire une précipitation de couleur rouge, jaune ou verte, présence de sucre réducteur.

iv. Test à l'iode:

Échantillon de solution et ajouter une solution d'iode pour produire une présence de polysaccharides de couleur bleue.

e) Test de lipides:

je. Test de Salkowski:

L'échantillon se dissout dans le chloroforme et ajoute un volume égal de H2SO4 concentré. Pour produire une couleur rouge bleuâtre à cerise à rouge cerise

ii. Test Liebermann Burchard:

L'échantillon est dissous dans du chloroforme dans un tube à essai sec. Ajouter quelques gouttes d’anhydride acétique et quelques gouttes de H2S04 concentré. La solution devient rouge, puis bleue et enfin bleu-vert.

f) Recherche de protéines:

je. Test de biuret:

À 2-3 ml de la solution d'échantillon dans un tube à essai et ajoutez un volume égal de solution à 10% de NaOH, mélangez soigneusement et ajoutez une solution à 0, 5% de sulfate de cuivre goutte à goutte en mélangeant goutte à goutte, jusqu'à obtenir une couleur violet violacé ou violet rosé est produit.

Méthodes quantitatives d'évaluation chimique:

Des constantes physico-chimiques quantitatives telles que l'indice d'acide, l'indice d'iode, l'indice d'acétyle, l'indice d'hydroxyle et l'indice de saponification, etc. sont utilisées pour les huiles et les graisses fixes.

i) Valeur acide:

L'indice d'acide est le nombre de mg d'hydroxyde de potassium nécessaire pour neutraliser l'acide libre dans 1 g de substance.

Détermination de l'indice d'acide:

Dans un ballon de 250 ml, pesez avec précision environ 10 g de substance, puis ajoutez 50 ml d'un mélange d'alcool et d'éther, d'un volume égal, qui a été neutralisé après addition de 1 ml de solution de phénolphtaléine.

Chauffer doucement au bain-marie, si nécessaire, jusqu'à ce que la substance soit complètement fondue, titrer avec de l'hydroxyde de potassium 0, 1 N, en agitant constamment jusqu'à obtenir une couleur rose qui persiste pendant 15 secondes. Notez le nombre de ml requis.

Calculez la valeur d'acide à l'aide de la formule suivante:

Valeur acide = ax 0.00561 x 1000 / w

a = Nombre de ml d'hydroxyde de potassium 0, 1 N requis

w = Poids en g de la substance prise.

Exemple:

(i) Cire d'abeille jaune: 5- 8

ii) Huile de ricin: pas moins de 2

(iii) Huile de foie de requin: pas plus de 2

ii) Valeur de saponification:

L'indice de saponification est le nombre de mg d'hydroxyde de potassium requis pour neutraliser l'acide gras, résultant de l'hydrolyse complète de 1 g de l'huile ou de la graisse.

Détermination de la valeur de saponification:

Pesez avec précision environ 2 g de substance dans un ballon taré de 250 ml, ajoutez 25 ml de la solution alcoolique d'hydroxyde de potassium, fixez un réfrigérant à reflux et faites bouillir au bain-marie pendant une heure en faisant tourner fréquemment le contenu du ballon. refroidir et ajouter 1 ml de solution de phénolphtaléine et titrer l'excès d'alcali avec de l'acide chlorhydrique 0, 5 N.

Calculez la valeur de saponification à l'aide de la formule suivante:

Valeur de saponification = (b - a) x 0, 02805 x 1000 / w

W = Poids en g de la substance prise.

Exemple:

(i) Huile de foie de requin: 150-200

ii) Huile de lin: 188-196

(iii) saindoux: 192 à 198

(iii) indice d'iode:

L'indice d'iode est le nombre qui exprime en grammes la quantité d'iode absorbée par 100 g de la substance.

Détermination de l'indice d'iode:

Méthode au monochlorure d'iode:

Placez la substance, pesée avec précision, dans une fiole d'iode sèche; ajouter 10 ml de trichlorure de carbone et dissoudre. Ajoutez 20 ml de solution de monochlorure d'iode, insérez le bouchon préalablement humidifié avec une solution d'iodure de potassium et laissez reposer pendant 30 minutes dans un endroit sombre à une température voisine de 17 °.

Ajouter 15 ml de solution d'iodure de potassium et 100 ml d'eau; agiter et titrer avec du thiosulfate de sodium 0, 1 N, en utilisant une solution d’amidon comme indicateur. Notez le nombre de ml requis (a).

Dans le même temps, effectuez l’opération exactement de la même manière, mais sans la substance à tester, et notez le nombre de ml de thiosulfate de sodium 0, 1 N requis (b).

Indice de Lodine Indice d'acide = (ba) x 0, 01269 x 100 / w

W = poids en grammes de la substance prise

Exemple:

i) huile d'olive: 79-88

(ii) Arachisoil: 85-100

(iii) huile de sésame: 103-116

iv) huile de foie de morue: 155-180

(v) Arachisoil: 84-100

Valeur acétyle:

Le nombre de mg de KOH nécessite de neutraliser l'acide acétique libéré par l'hydrolyse de 1 g de substance acétylée et de déterminer l'indice de saponification.

Détermination de la valeur acétyle:

Acétylation:

Prendre 10 g de substance avec 20 ml d'anhydride acétique dans un ballon à fond rond de 200 ml. Reflex, en chauffant à l'amiante sur flamme contrôlée. Faites bouillir doucement pendant 2 heures, laissez refroidir, versez dans 600 ml d'eau dans un grand bécher, ajoutez 0, 2 g de poudre de pierre ponce et faites bouillir pendant 30 min, laissez refroidir et transférez dans un séparateur.

Jeter la couche inférieure. Laver le produit acétylé avec 3 x 50 ml de solution saturée de NaCl chauffée et vérifier l'absence d'acide au tournesol. Enfin, agitez avec 20 ml d’eau et retirez la couche aqueuse aussi complètement que possible.

Versez la substance acétylée dans un petit plat, ajoutez 1 g de sulfate de sodium anhydre en poudre, remuez bien et filtrez sur un papier filtre plissé sec. Déterminer la valeur de saponification de la substance acétylée.

Valeur de l'acétie = (ba) x 1335/1335 - a

a = valeur de saponification de la substance.

b. Valeur de saponification de la substance acétylée.

Valeur d'hydroxyle:

L'indice d'hydroxyle est le nombre de milligrammes d'hydroxyde de potassium nécessaire pour neutraliser l'acide combiné par acylation dans 1 g de substance.

Détermination de l'indice d'hydroxyle:

Pour spécifier la quantité de substance, ajouter 12 g d’anhydride stéarique et 10 xylène, chauffer doucement au reflux pendant 30 min, refroidir, ajouter un mélange de 40 ml de pyridine et 4 ml d’eau et chauffer à reflux pendant 30 min. titrer la solution chaude avec NaOH N en utilisant un indicateur de phénolphtaléine. Répétez sans substance.

L'indice d'hydroxyle peut être calculé à partir de ce qui suit:

Valeur d'hydroxyle = vx 56.11 / w

V = différent entre les deux titrages

B = poids (g) de la substance.

Exemple: huile de germe de blé: 10-48

Valeur de l'ester:

Nombre de mg de KOH nécessaires pour neutraliser les acides résultant de l'hydrolyse complète de 1 g de la substance.

Détermination de la valeur de l'ester:

Estérification:

Faites bouillir une quantité d'éthanol à 95% pour éliminer le CO ₂ dissous et neutraliser avec de la phénolphtaléine.

Pesez 2 g de la substance, dissolvez-la dans 5 ml de l'alcool neutralisé et neutralisez à 0, 1 N avec du KOH alcoolique dont la quantité doit être plus de deux fois supérieure à la quantité de la substance absorbée. Utilisez pour cela 0, 2 ml d’indicateur de phénolphtaléine.

Ajouter 25 ml de KOH alcoolique (0, 5 N), réflexe pendant 1 heure. Ajoutez 20 ml d'eau et titrez l'excès d'alcali avec HCl 0, 5 N avec une quantité supplémentaire de 0, 2 ml de phénolphtaléine. Répétez la procédure sans substance.

La différence entre les deux valeurs de titrages obtenues donne la valeur de l'alcali nécessaire pour saponifier l'ester.