Pertinence clinique du test de Coomb (test à l'antiglobuline)

Le test de Coombs est une technique simple et ingénieuse. Le test de Coombs a été décrit pour la première fois en 1908 par Moreschi et a ensuite été redécouvert par RR Coombs et ses collègues en 1945 afin de mettre en évidence des anticorps non agglutinants dirigés contre les antigènes des globules rouges.

(Les anticorps sont appelés anticorps "non agglutinants" car ils ne peuvent pas causer d'agglutination, malgré leur liaison avec les antigènes des globules rouges. Ils sont aussi parfois appelés "anticorps incomplets" car les anticorps ne causent pas agglutination. Mais il n’ya pas d’incomplétude dans la structure de la molécule d’anticorps).

En fait, les anticorps non agglutinants se lient aux antigènes à la surface des globules rouges. Mais l'agglutination attendue des globules rouges ne se produit pas. Lorsque l'on ajoute un autre anticorps (appelé anti-anticorps ou antiglobuline) contre l'anticorps lié aux globules rouges, il se produit une agglutination. Les anti-anticorps se lient aux régions Fc des anticorps liés aux globules rouges et forment un réseau qui conduit à l'agglutination. Le test est appelé test à l'antiglobuline ou test de Coombs.

Il existe deux types de tests anti-globuline:

1. Test anti-globuline direct (DAT)

2. Test anti-globuline indirect (LAT)

1. Le test anti-globuline directe (DAT) est utilisé pour détecter les anticorps liés aux globules rouges in vivo.

Les globules rouges lavés d'un patient sont mélangés avec un anti-globuline.

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Les anti-globulines se lient aux anticorps non agglutinants à la surface des globules rouges et provoquent une agglutination visible. Le résultat du test est DAT positif (Fig. 16.6).

Par conséquent, un DAT positif suggère que les globules rouges du patient sont recouverts d'anticorps non agglutinants et que le patient est dit positif au DAT.

je. La DAT positive se produit avec les globules rouges du nouveau-né atteint d'une maladie hémolytique du nouveau-né (les globules rouges du HDN sont recouverts d'anticorps anti-Rh).

ii. Actuellement, le DAT est utilisé pour détecter les anticorps IgG et C3b liés à la surface des globules rouges. Chez les patients présentant une hémolyse, le test DAT est utile pour déterminer si l'hémolyse est d'origine immunologique ou non.

Fig. 16.6: Test d’agglutination directe (DAT) de Coomb.

Le DAT est utilisé pour détecter la présence d'anticorps non agglutinants liés à la surface des globules rouges. A. Les globules rouges lavés de la personne sont mélangés avec le réactif anti-globuline. Les anti-globulines se lient aux régions Fc des anticorps liés aux RBC et provoquent une agglutination visible. L'individu est dit positif au DAT. B. Si les globules rouges ne sont pas recouverts d'anticorps, il n'y aura pas d'agglutination et l'individu est dit être DAT négatif. Le DAT est également utilisé pour détecter la présence de globules rouges nouveau-nés recouverts d'anticorps anti-Rh et suspectés de souffrir d'une maladie hémolytique du nouveau-né.

je. Les causes non-immunes de l'hémolyse [telles que la coagulation intravasculaire disséminée, les déficiences en enzyme érythrocytaire [comme le déficit en glucose-6-phosphate déshydrogénase (déficit en G6PD), les défauts de la membrane des globules rouges (tels que la sphérocytose héréditaire, HPN) et les hémoglobinopathies (telles que drépanocytose, thalassémie)] sont négativement DAT.

ii. Les causes immunitaires de l'hémolyse (telles que l'anémie hémolytique auto-immune, l'hémolyse induite par le médicament, les réactions transfusionnelles hémolytiques) sont positives au DAT.

iii. Un DAT positif dû à C3 seul est observé chez les patients présentant des autoanticorps froids, une hémoglobinurie froide paroxystique et, dans certains cas, des anémies hémolytiques induites par le médicament.

2. Le test d'agglutination indirecte (IAT) est utilisé pour détecter la présence d'anticorps non liés dirigés contre les globules rouges dans le sérum d'un patient.

je. L'IAT pour détecter les anticorps anti-Rh dans le sérum de la mère:

Le sérum de la mère est incubé avec les globules rouges Rh positifs. Si des anticorps anti-Rh sont présents dans le sérum de la mère, ils se lieront aux globules rouges. Les globules rouges sont ensuite lavés.

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Ensuite, le réactif anti-globuline est ajouté.

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Si des anticorps anti-Rh sont présents dans le sérum de la mère, les globules rouges seraient agglutinés et le test serait positif pour l'IAT.

ii. IAT pour détecter les anticorps dans le sérum d'un receveur contre les globules rouges du donneur lors d'une transfusion sanguine:

Le test IAT est largement utilisé (avant la transfusion sanguine) dans la mise en correspondance des globules rouges du donneur avec le sérum du receveur afin de détecter la présence d'anticorps chez le receveur, susceptibles de réagir avec les globules rouges du donneur.

Laver les globules rouges du donneur.

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Ajouter le sérum du receveur aux globules rouges et incuber à 37 ° C pendant 30 minutes.

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Lavez les globules rouges.

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Ajouter le réactif anti-globuline.

Le développement de l'agglutination indique que le sérum du receveur contient des anticorps contre les globules rouges du donneur et que le test est déclaré positif pour les anticorps. Un résultat IAT positif indique que le sang du donneur proposé ne doit pas être transfusé au receveur en question.

Les préparations actuelles de réactifs de test anti-globuline (également appelé réactif de Coombs) contiennent un "cocktail" d'anticorps monoclonaux dirigés contre les IgG et C3b humaines Les globules rouges, et donc en dehors des anticorps, les globules rouges sont également recouverts de fragments de C3b).