Notes utiles sur l'enzyme papaïne et l'enzyme pepsine

Les immunoglobulines sont des protéines et sont généralement résistantes à la digestion par les enzymes.

Cependant, l'enzyme papaïne et la pepsine clivent les molécules d'immunoglobuline. Les fragments générés par la papaïne et la pepsine sont utiles pour les études sur la structure et les fonctions des immunoglobulines. Mais les sites de clivage de ces deux enzymes sont différents (figure 9.5).

Fig. 9.5: Schéma de principe de la fragmentation protéolytique de l'immunoglobuline par traitement bref par les enzymes papaïne et pepsine.

L'enzyme papaïne clive l'immunoglobuline du côté N-terminal de la liaison disulfure de chaîne lourde et produit trois fragments (deux fragments Fab et un fragment Fc). L'enzyme pepsine clive l'immunoglobuline au niveau de la région C-terminale et produit un grand fragment (qui contient deux régions Fab) appelé F (ab ') 2 . Les chaînes lourdes restantes du côté C-terminal sont digérées en plusieurs petits peptides

1. Enzyme Papain:

L'enzyme papaïne clive la région charnière du côté N-terminal des disulfures inter-chaînes lourdes, ce qui entraîne la formation de trois fragments. (Deux fragments contenant la région variable et un fragment contenant les régions C H 2 et C H 3). Les deux fragments contenant la région variable sont appelés; Les fragments Fab (c'est-à-dire la liaison antigène de fragment) car ils possèdent les sites de liaison à l'antigène.

Le troisième fragment comprend les parties carboxy-terminales des deux chaînes lourdes maintenues ensemble par des disulfures. Généralement, la structure du troisième fragment est identique pour de nombreuses molécules d'immunoglobuline différentes.

Par conséquent, des fragments de ces types peuvent être cristallisés même s'ils consistent en de nombreuses immunoglobulines différentes. Donc, ce fragment est appelé le fragment cristallisable ou fragment Fc. La plupart des propriétés biologiques secondaires des immunoglobulines dépendent des séquences de la région Fc. C'est aussi la région reconnue par les récepteurs Fc sur de nombreux types de cellules.

2. Enzyme Pepsine:

L'enzyme pepsine clive l'immunoglobuline du côté carboxy-terminal de la région charnière, ce qui donne un grand fragment appelé F (ab ') 2 . Le F (ab ') 2 a deux fragments Fab liés par des liaisons disulfure. La région Fc est fortement dégradée par la pepsine et il ne reste généralement pas de fragment Fc intact après digestion par la pepsine.